Библиотека сельскохозяйственной литературы

При оценке растительного материала в селекции часто определяют не количество белкового вещества растений, а содержание так называемого «сырого протеина», в этом случае не проводят осаждения белка, а весь найденный общий азот считают белковым. Без осаждения белкового азота при сжигании в серной кислоте связываются и другие азотистые соединения растений, так называемый свободный азот. Результат получается несколько завышенный, но» для оценки и браковки селекционного материала этот способ вполне приемлем.

Для определения общего азота чаще всего применяют микрометод Кьельдаля, который основан на минерализации навески анализируемого вещества в концентрированной серной кислоте, при этом выделяющийся аммиак связывается ею, а затем отгоняется щелочью. По количеству выделившегося аммиака вычисляют содержание азота и пересчитывают его на содержание сырого протеина.

Ход анализа. Взятие навески. Из тщательно перемешанного образца размолотого зерна на аналитических весах берут две навески по 0,2 г. (с точностью до 0,0001 г). Одну навеску отбирают в предварительно высушенный и взвешенный бюкс для определения влажности путем высушивания в сушильном шкафу при температуре 130 °С в течение 40 мин, другую взвешивают в специально приспособленной пробирке. После взвешивания пробирку с навеской вставляют возможно глубже в колбу Кьельдаля объемом 50—100 мл и, не допуская распыления размолотого зерна по стенкам шейки колбы, высыпают навеску в колбу, а затем взвешивают пустую пробирку. По разности между результатами первого и второго взвешиваний определяют величину взятой навески размолотого зерна.

Сжигание. В колбу с навеской осторожно с помощью автоматической бюретки или мерного цилиндра приливают 5 мл концентрированной H2S04 и добавляют 0,2 г. селенового катализатора. Содержимое колбы аккуратно перемешивают, следя за тем, чтобы вся навеска была смочена серной кислотой, закрывают полой стеклянной пробкой и помещают в устройство для сжигания (обязательно в вытяжном шкафу!), где при слабом кипячении сжигание проводят до полного обесцвечивания раствора.